参考标准：GB 5009.35-2016 食品安全国家标准 食品中合成着色剂的测定、GB 2760-2014 食品安全国家标准 食品添加剂使用标准

        《GB 2760-2014 食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》对蜜饯和肉制品中准许使用的人工合成色素有严格规定，但很多蜜饯和肉制品生产厂家为了颜色鲜艳，仍然违规添加部分合成色素。蜜饯和肉制品类样品基质复杂，色素提取净化过程麻烦，因此建立蜜饯和肉制品中简便、快速的合成色素多组分检测方法非常有必要。

方法优势
        对比国标《GB 5009.35-2016 食品安全国家标准 食品中合成着色剂的测定》，迪马科技技术实验室开发的《话梅、鸡腿及肉肠中人工合成着色剂的检测》方法：
(1) 采用乙醇、乙腈和水提取，ProElut PWA-2固相萃取柱净化，HPLC-PDA检测；
(2) 具有提取方法简单、回收率高、净化效果优异、方法稳定性好等优点；
(3) 方法检出限：亮蓝是1.0 mg/kg，其他着色剂是0.2 mg/kg，与国标一致。

话梅、鸡腿及火腿中人工合成着色剂的检测——SPE/HPLC法

1、适用范围
        本方案适用于话梅、鸡腿及火腿（肉肠）中柠檬黄、新红、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄、酸性红、诱惑红、亮蓝和赤藓红等10种人工合成着色剂的检测，方法检出限：亮蓝是1.0 mg/kg，其他的着色剂是0.2 mg/kg。

2、标准品配制
(1) 单标储备液1000 μg/mL，称取适量色素单标，用10%甲醇水配制成1000 μg/mL的单标储备液。
(2) 混标中间液100.0 μg/mL，吸取适量储备液单标1000 μg/mL，用10%甲醇水配制成100 μg/mL的混标中间液。

3、提取
3.1 话梅
(1) 取1.0 g话梅，加入5 mL提取液A*，于70 ℃水浴超声振荡10 min使其分散，再加15 mL提取液A*振荡2 min，70 ℃水浴超声提取10 min，6000 rpm下离心2 min，收集上清液；
(2) 取下层残留物，加入20 mL提取液A*，振荡2 min，70 ℃水浴超声提取15 min，6000 rpm下离心
2 min，收集上清液；
(3) 再向下层残留物，加入20 mL提取液A*按(2)重复提取一次，合并三次上清液；
(4) 在35 ℃水浴条件下，减压蒸至约18 mL，再加入3 mL甲酸混匀，待净化。

3.2 鸡腿、火腿（肉肠）
(1) 1.0 g样品，加入1 g C18，加入20 mL提取液A*，振荡2 min，60 ℃水浴超声提取10 min，6000 rpm下离心2 min，收集上清液；
(2) 取下层残留物，加入10 mL提取液A*，振荡2 min，60 ℃水浴超声提取15 min，6000 rpm下离心
2 min，收集上清液；
(3) 再向下层残留物中，加入10 mL提取液A*按(2)重复提取一次，合并三次上清液；
(4) 在35 ℃水浴条件下，减压蒸至约12 mL，再加入3 mL甲酸混匀，待净化。

*提取液A：取100 mL乙醇和50 mL乙腈，混匀，取140 mL乙醇：乙腈（2：1）混合溶液，加入60 mL水和2 mL氨水，混匀。

4、净化—— ProElut PWA-2 150 mg/6 mL（Cat.# 65815）
(1)活    化： 依次用5 mL甲醇、5 mL 10%甲酸水，流出液弃去；
(2)上    样： 将上样液加入柱中，流出液弃去；
(3)淋    洗： 依次用5 mL水、5 mL甲醇淋洗，流出液弃去；
(4)洗    脱： 6 mL 15%氨水甲醇洗脱，收集洗脱液；
(5)定    容： 将洗脱液在50 ℃下氮吹至约300 μL，用流动相定容至1 mL，上机分析。

5、色谱条件
色谱柱：Inspire C18，250 mm × 4.6 mm，5 μm（Cat.# 81006）
流  速：1.0 mL/min   
进样量：20 μL  
柱  温：35 ℃
检测器：PDA 254 nm
流动相：A：乙腈   B：0.02 mol/L乙酸铵溶液
梯度设置

6、添加回收结果

表1  食品中人工合成着色剂检测的添加回收结果 (%)

注：
*回收率：个别有干扰的目标峰用最大吸收波长积分；
*柠檬黄：话梅类样品做柠檬黄时，回收率重现性不好。

表2  样品空白含量（mg/kg）

人工合成着色剂标准品（10 mg/L)检测的液相色谱图

人工合成着色剂标准品（1 mg/L)检测的液相色谱图

话梅（添加水平为10 mg/kg）中人工合成着色剂检测的液相色谱图

  
话梅（添加水平为1 mg/kg）中人工合成着色剂检测的液相色谱图

话梅（空白样品）中人工合成着色剂检测的液相色谱图

鸡腿（添加水平为10 mg/kg）中人工合成着色剂检测的液相色谱图

鸡腿（添加水平为1 mg/kg）中人工合成着色剂检测的液相色谱图

鸡腿（空白样品）中人工合成着色剂检测的液相色谱图

火腿（添加水平为10 mg/kg）中人工合成着色剂检测的液相色谱图

火腿（添加水平为1 mg/kg）中人工合成着色剂检测的液相色谱图

火腿（空白样品）中人工合成着色剂检测的液相色谱图

话梅、鸡腿及火腿中人工合成着色剂的检测——SPE/HPLC法相关产品信息

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