白藜芦醇及其糖苷是广泛存在于葡萄属植物中的一种具有保健作用的植物应激素，具有顺式和反式两种构型。通常条件下，多数方法不能同时测定4种异构体，因而测定结果不能真实反映葡萄酒中白藜芦醇异构体的含量。

        迪马科技建立的《葡萄酒中白藜芦醇苷和白藜芦醇的测定》方案，无需样品提取过程，调节pH 后，直接使用ProElut BLC 白藜芦醇检测专用固相萃取柱进行净化，高效液相色谱法检测。可以为选择葡萄品种、改进酿造工艺、判断红酒真伪及质量等等方面提供重要的参考。

专用柱优势：
        ProElut BLC 柱填料由多种吸附剂按照一定的比例分层填装而成，采用多种作用机理去除葡萄酒中酚类化合物，如黄酮、花色素、单宁等，适用于各类葡萄酒中白藜芦醇的检测；本产品是商品化的成品柱，吸附剂稳定性好，不受外界环境因素影响，保证实验结果的重现性和准确性；过柱过程中操作步骤简单，有机溶剂用量少，减少对人体的危害同时提高工作效率。

        以下为详细解决方案，敬请参考！

葡萄酒中白藜芦醇苷和白藜芦醇的测定

1、适用范围
        本方案适用于葡萄酒中顺反式白藜芦醇苷和顺反式白藜芦醇的检测。

2、标准品配制
(1) 标品
① 储备液：
反式白藜芦醇苷1000 μg/mL：溶剂为甲醇；
反式白藜芦醇1000 μg/mL：溶剂为甲醇。

② 混合标准溶液制备：
顺反式白藜芦醇苷混标：取1 mL反式白藜芦醇苷1000 μg/mL储备液于透明10 mL带盖玻璃管中，在254 nm和365 nm混合波长下避光照2 h，取40 μL用30%乙腈水稀释至1 mL，同时制备40 μg/mL反式白藜芦醇苷溶液，进行HPLC分析，采用外标法以峰面积进行计算，得反式白藜芦醇苷浓度295 μg/mL、即顺式白藜芦醇苷浓度705 μg/mL；

顺反式白藜芦醇混标：取1 mL反式白藜芦醇1000 μg/mL储备液于透明10 mL带盖玻璃管中，在254 nm和365 nm混合波长下避光照2 h，取40 μL用30%乙腈水稀释至1 mL，同时制备40 μg/mL反式白藜芦醇溶液，进行HPLC分析，采用外标法以峰面积进行计算，得反式白藜芦醇浓度405 μg/mL、即顺式白藜芦醇浓度595 μg/mL；

四种物质混合标准溶液：取等体积的顺反式白藜芦醇苷混标和顺反式白藜芦醇混标混匀，得到四种物质混标，浓度分别为：反式白藜芦醇苷浓度147.5 μg/mL、顺式白藜芦醇苷浓度352.5 μg/mL、反式白藜芦醇浓度202.5 μg/mL、顺式白藜芦醇浓度297.5 μg/mL；

(2) 加标方法：取四种物质混合标准溶液400 μL，加至5 mL样品中。

3、样品制备
取约50mL样品于100 mL烧杯中，用氨水调节样品pH至6.0，取出5 mL待净化（如需进行回收率测试，在此步骤加入混合标准品）。

4、净化——ProElut BLC 6 mL（Cat.# 65918）
a活    化： 依次加入5 mL甲醇、5 mL水，流出液弃去；
b上    样： 加入待净化液，流出液弃去；
c淋    洗： 加入5 mL 30%甲醇水，流出液弃去，推干小柱；
d洗    脱： 加入5 mL甲醇，收集流出液；
e重新溶解： 将流出液在55 ℃下氮吹至低于1 mL，用流动相定容至5 mL，供HPLC分析。

5、色谱条件
色谱柱： Platisil ODS 250 × 4.6 mm, 5 μm（Cat.# 99503）
流  速： 1.0 mL/min
检测器： 303 nm
柱  温： 30 ℃
进样量： 20 μL
流动相： 乙腈：水 =30:70

6、添加回收结果

白藜芦醇苷和白藜芦醇的HPLC检测的添加回收结果

白藜芦醇苷和白藜芦醇的HPLC检测的添加回收结果

7、色谱图

白藜芦醇苷和白藜芦醇的标准液相色谱图

甘露之城干红葡萄酒（空白样品）的液相色谱图

甘露之城干红葡萄酒（加标样品）的液相色谱图

拉菲葡萄酒（空白样品）的液相色谱图

拉菲葡萄酒（加标样品）的液相色谱图

葡萄酒中白藜芦醇苷和白藜芦醇的测定相关产品信息：

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