2018-12-25
草甘膦(Glyphosate,Gly)是广泛使用的一类广谱非选择性除草剂,以其高效、廉价等特性被运用于全球各个农业和非农业领域。其在环境和生物体中富集并通过食品进入人体,会对人体健康造成危害。随着其在茶叶上的广泛使用,草甘膦及其主要代谢产物氨甲基膦酸残留问题也越来越受关注。目前常用的检测方法为离子交换净化、七氟丁醇(HFB)和三氟乙酸酐(TFAA)衍生后GC-MS检测,或9-芴基甲基三氯甲烷衍生后LC-MS/MS检测,这些方法通常存在操作时间长、需要衍生等问题,因此建立一种简便、快捷、有效的草甘膦及其代谢物残留的检测方法具有重要的意义。
迪马科技在参考各种标准及文献的基础上,建立了SPE-UPLC-MS/MS法测定茶叶中草甘膦及其代谢物氨甲基膦酸的检测方法:采用水提取,ProElut GLY固相萃取专用柱净化样品,收集流出液,Dikma Polyamino HILIC色谱柱分离检测,该方法特点:
1) 前处理步骤少,提取液直接通过净化柱接收流出液即可;
2) 有机溶剂消耗量小,前处理过程中也无需使用酸碱试剂;
3) 仪器分析简单,样品无需衍生直接分析,可提高结果稳定性及减少实验成本;
4) 方法定量限0.1 mg/kg。
以下为详细解决方案,敬请参考!
茶叶中草甘膦及其代谢物的测定SPE-UPLC-MS/MS法
1、适用范围
本方法适用于绿茶、花茶、铁观音、红茶和普洱茶中氨甲基膦酸和草甘膦的检测,定量限0.1 mg/kg。
2、标准品配制
单标标准储备液:准确称取各标准品,用水配制成1000 μg/mL的单标标准储备液。
混标标准中间液:分别吸取各单标标准储备液,用水配制成1.0 μg/mL、10 μg/mL和50 μg/mL的混标标准中间液。
3、提取
取1 g茶叶于50 mL离心管中,准确加入10 mL水、10 mL二氯甲烷,振荡10 min,超声10 min,8000 rpm离心5 min,取5 mL上清液,待净化。
4、净化——ProElut GLY 6 mL (Cat.#: 65938)
(1)活 化: 依次加入5 mL甲醇、5 mL水,弃去流出液;
(2)上 样: 将待净化液加入柱中,弃去前3 mL流出液,收集后2 mL流出液,混匀,滤液过0.22 μm尼龙滤膜,上机分析。
注:同方法制备基质匹配标准溶液。
5、UPLC-MS/MS条件
5.1 UPLC 条件
色谱柱:Dikma Polyamino HILIC, 150 × 2.0 mm, 5 μm (Cat.#:99302)
流 速:0.2 mL/min 进样量:10 μL 柱 温:35 ℃
流动相: A:乙腈 B:5 mM乙酸铵溶液,氨水调节至pH=11
梯度设置:
Time(min) |
0 |
2 |
2.1 |
8 |
8.1 |
15 |
A(%) |
80 |
80 |
20 |
20 |
80 |
80 |
B(%) |
20 |
20 |
80 |
80 |
20 |
20 |
5.2 质谱条件
电离模式:ESI |
扫描方式:负离子扫描 |
检测方式:多反应监测 |
电喷雾电压:-4500 V |
雾化气压力:60 psi |
辅助气压力:60 psi |
气帘气压力:35 psi |
离子源温度:550 ℃ |
定性离子对、定量离子对、碰撞气能量及去簇电压见下表
目标化合物 |
定性离子对 (m/z) (母离子/子离子) |
定量离子对 (m/z) (母离子/子离子) |
碰撞气能量/eV |
去簇电压/V |
氨甲基膦酸 |
109.9/62.8 |
109.9/62.8 |
-23 |
-53 |
109.9/78.9 |
-35 |
-51 |
||
草甘膦 |
167.8/62.8 |
167.8/62.8 |
-30 |
-50 |
167.8/81.0 |
-21 |
-31 |
6、添加回收结果
茶叶中氨甲基膦酸和草甘膦的LC-MS/MS检测添加回收结果:
样品 基质 |
回收率(%) |
|||||
添加水平:0.1 mg/kg |
添加水平:1 mg/kg |
添加水平:5 mg/kg |
||||
加标量:1.0 μg/mL,加100 μL |
加标量:10 μg/mL,加100 μL |
加标量:50 μg/mL,加100 μL |
||||
氨甲基膦酸 |
草甘膦 |
氨甲基膦酸 |
草甘膦 |
氨甲基膦酸 |
草甘膦 |
|
绿茶 |
103 |
91 |
99 |
109 |
92 |
101 |
花茶 |
95 |
105 |
109 |
85 |
93 |
99 |
铁观音 |
84 |
81 |
83 |
94 |
80 |
100 |
红茶 |
100 |
101 |
86 |
85 |
89 |
98 |
普洱茶 |
80 |
95 |
89 |
95 |
88 |
102 |
茶叶中草甘膦及其代谢物的测定SPE-UPLC-MS/MS法相关产品信息:
货号 |
名称 |
规格 |
样品前处理 |
||
65938 |
草甘膦检测专用固相萃取柱 ProElut GLY |
6 mL, 30/pk |
244358 |
12管防交叉污染真空SPE萃取装置 |
12位 |
4803 |
1,3,6 mL柱管通用连接器 |
15/pk |
4806 |
考克(控制流量) |
15/pk |
99011 |
真空/正压两用泵,无油 |
1/pk |
99013 |
抽滤瓶套装 (包括硅橡胶管2米,2 L抽滤瓶及橡胶塞) |
1/pk |
30039 |
FitMax针头式过滤器 Nylon |
13 mm, 0.22 μm 100/pk |
标准品 |
||
12-MET-12133A-100MG |
氨甲基膦酸 [1066-51-9] |
100 mg |
46010 |
草甘膦 [1071-83-6] |
100 mg |
色谱柱及保护柱 |
||
99302 |
Dikma Polyamino HILIC |
150 x 2.0 mm, 5 μm |
HPLC溶剂·缓冲盐·离子对试剂 |
||
50101 |
乙腈 HPLC级 |
4 L |
50102 |
甲醇 HPLC级 |
4 L |
50117 |
二氯甲烷 HPLC级 |
4 L |
50138 |
乙酸铵 HPLC级 |
100 g |
通用色谱产品 |
||
52401B |
瓶架/蓝色(现货) |
50孔 |
52401A |
瓶架/白色(现货) |
50孔 |
1034 |
样品瓶(棕色/螺纹) |
2 mL, 100/pk |
1035 |
样品瓶盖/含垫(已经组装) |
100/pk |
H80465 |
HPLC 进样针 |
25 μL |
红色产品货号#30039、#1034、#1035火热促销中