2014-01-07
以下为详细解决方案，敬请参考！
1、适用范围
本方案适用于火腿肠等肉制品中苏丹红Ⅰ、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ和苏丹红Ⅳ的检测，方法检出限是1 μg /kg。
2、提取
(1) 取5.0 g样品，加入5 g无水硫酸钠，搅匀，加入20 mL正己烷混合，振荡5 min，超声提取5 min，8000 rpm下离心2 min，收集上清液
(2) 将下层残留物用20 mL正己烷按照步骤(1)重复提取一次，合并两次上清液；
(3) 将上清液在40 ℃水浴条件下，减压蒸至近干，再加入5 mL正己烷混匀，待净化。
3、净化——ProElut SDH 6 mL（Cat.#65909）
a活 化：
5 mL正己烷活化；
b上 样：
加入待净化液，弃去流出液；
c淋 洗：
依次加入5 mL正己烷，5 mL 1%乙酸乙酯正己烷，弃去流出液；
d洗 脱：
加入10 mL 30%乙酸乙酯正己烷，收集流出液；
e重新溶解：
将洗脱液在40 ℃下减压蒸馏近干，用40%甲基叔丁基醚正己烷溶液定容至1 mL，供HPLC分析。
4、色谱条件
色谱柱：Diamonsil C18(2), 250 mm × 4.6 mm, 5 μm（Cat# 99603）
流 速：1.0 mL/min
进样量：20 μL
柱 温：40 ℃
检测器：PDA 518 nm
流动相：A：0. 2% 磷酸水溶液 B：乙腈
梯度设置
|
时间/Min. |
0 |
18 |
20 |
30 |
30.1 |
40 |
|
A（%） |
12 |
12 |
0 |
0 |
12 |
12 |
|
B（%） |
88 |
88 |
100 |
100 |
88 |
88 |
5、添加回收结果
含淀粉较多的火腿肠(淀粉肠)中苏丹红的HPLC检测添加回收结果
|
分析物 |
添加水平(mg/kg) |
回收率(%) |
|
苏丹红Ⅰ |
0.1 |
95.42 |
|
苏丹红Ⅱ |
0.1 |
96.94 |
|
苏丹红Ⅲ |
0.1 |
91.02 |
|
苏丹红Ⅳ |
0.1 |
90.75 |
不含淀粉或含淀粉较少的火腿肠(肉肠)中苏丹红的HPLC检测添加回收结果
|
分析物 |
添加水平(mg/kg) |
回收率(%) |
|
苏丹红Ⅰ |
0.1 |
95.66 |
|
苏丹红Ⅱ |
0.1 |
95.37 |
|
苏丹红Ⅲ |
0.1 |
89.96 |
|
苏丹红Ⅳ |
0.1 |
92.34 |
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火腿肠中苏丹红染料的测定相关产品信息：
|
货号 |
名称 |
规格 |
|
样品前处理 |
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|
65909 |
苏丹红检测专用固相萃取柱
ProElut SDH |
6 mL, 30/pk |
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65584 |
ProElut Na2SO4 无水硫酸钠 |
500 g |
|
244358 |
12管防交叉污染真空SPE萃取装置 |
12位 |
|
4803 |
1,3,6 mL柱管通用连接器 |
15/pk |
|
4806 |
考克(控制流量) |
15/pk |
|
99011 |
真空/正压两用泵，无油 |
1/pk |
|
99013 |
抽滤瓶套装
(包括硅橡胶管 |
1/pk |
|
37177 |
针头式过滤器 Nylon |
|
|
37180 |
针头式过滤器 Nylon |
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色谱柱及保护柱 |
||
|
99603 |
反相高效液相色谱柱
Diamonsil C18(2) |
250 × |
|
6201 |
EasyGuard C18 保护柱套装 |
10 × 4.0
1个柱套 + 2个柱芯 |
|
标准品 |
||
|
50P-C16986101 |
苏丹红Ⅰ[ |
250 mg |
|
50P-C16986102 |
苏丹红Ⅱ[3118-97-6] |
250 mg |
|
50P-C16986103 |
苏丹红Ⅲ[85-86-9] |
250 mg |
|
50P-C16986104 |
苏丹红Ⅳ[85-83-6] |
250 mg |
|
HPLC溶剂Ÿ缓冲盐Ÿ离子对试剂 |
||
|
50101 |
乙腈 HPLC级 |
|
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50115 |
正己烷 HPLC级 |
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|
50104 |
乙酸乙酯 HPLC级 |
|
|
50123 |
甲基叔丁基醚 HPLC级 |
|
|
50133 |
磷酸 HPLC级 |
50 mL |
|
通用色谱产品 |
||
|
52401B |
瓶架/蓝色 |
50 孔 |
|
|
瓶架/白色 |
50孔 |
|
5323 |
样品瓶（棕色/螺纹） |
2 mL, 100/pk |
|
5325 |
样品瓶盖/含垫（已经组装） |
100/pk |
|
H80465 |
HPLC 进样针 |
25 μL |
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