2014-05-26
有机酸的含量与组成比例是确定青贮饲料发酵特性和评价青贮品质的重要指标。青贮饲料质量的好坏取决于乳酸菌作用，乳酸是乳酸菌的主要产物，其含量是反映青贮饲料质量最重要的指标，乙酸的生成量与青贮饲料品质呈负相关，丙酸可以抑制真菌繁殖，防止二次发酵，丁酸由酪酸菌产生，可直接反应青贮饲料的腐败程度。
方法优势
迪马科技建立青贮饲料中有机酸的解决方案，采用ProElut PSA固相萃取柱，盐酸水溶液洗脱，本方案简化前处理步骤，不使用有机溶剂，减少人体伤害，降低实验成本，节省大量时间，并减少杂质的干扰，回收率达80%以上。
以下为详细解决方案，敬请参考！
1、适用范围
适用于饲料中乳酸、乙酸、丙酸和丁酸的检测。
2、样品准备
(1) 取
(2) 取出上层清液进行过滤，收集滤液，待净化。
3、SPE柱净化——ProElut PSA 500 mg/6 mL (Cat.#：63205)
|
(1) 活 化： |
依次向柱中加入5 mL甲醇、5 mL水，弃去流出液； |
|
(2) 上 样： |
取1 mL待净化液加入柱中，弃去流出液； |
|
(3) 淋 洗： |
向柱中加入5 mL水，弃去流出液； |
|
(4) 洗 脱： |
向柱中加入5 mL 0.5 mol/L 盐酸水溶液，收集流出液； |
|
(5) 定 容： |
将洗脱液用水定容至5 mL，供HPLC分析。 |
4、分析条件
|
色谱柱： |
Suprsil C18，150 mm × |
|
流 速： |
1.0 mL/min |
|
检测器： |
UV 214 nm |
|
柱 温： |
30 ℃ |
|
进样量： |
20 μL |
|
流动相： |
25 mmol/L 磷酸二氢钾水溶液，用磷酸调pH至2.5 |
5、添加回收结果
饲料中有机酸添加回收结果
|
NO. |
化合物名称 |
添加水平（mg/kg） |
回收率（%） |
|
1 |
乳酸 |
500 |
119.92 |
|
2 |
乙酸 |
200 |
112.27 |
|
3 |
丙酸 |
500 |
92.27 |
|
4 |
丁酸 |
1000 |
86.72 |
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青贮饲料中有机酸的检测相关产品信息：
|
货号 |
名称 |
规格 |
|
样品前处理 |
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|
63205 |
ProElut PSA |
500 mg/6 mL 30/pk |
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244358 |
12管防交叉污染真空SPE萃取装置 |
12位 |
|
4803 |
1,3,6mL柱管通用连接器 |
15/pk |
|
4806 |
考克(控制流量) |
15/pk |
|
99011 |
真空/正压两用泵，无油 |
1/pk |
|
99013 |
抽滤瓶套装
(包括硅橡胶管 |
1/pk |
|
37177 |
针头式过滤器 Nylon |
|
|
37180 |
针头式过滤器 Nylon |
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|
色谱柱及保护柱 |
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|
82001 |
极性改性通用型反相色谱柱
Spursil C18 |
150 × |
|
6221 |
EasyGuard保护柱柱套 |
适合 10 mm 柱芯，1/pk |
|
6803 |
Spursil C18保护柱柱芯 |
5 μm, 10 x 4.0 mm 2/pk |
|
标准品 |
||
|
12-N-12303-2G |
乳酸[50-21-5] |
2 g |
|
12-N-11011-10G |
乙酸[64-19-7] |
10 g |
|
12-N-13115-10G |
丙酸[79-09-4] |
10 g |
|
12-N-11388-10G |
丁酸[107-92-6] |
10 g |
|
HPLC溶剂Ÿ缓冲盐Ÿ离子对试剂 |
||
|
50102 |
甲醇 HPLC级 |
|
|
50159 |
磷酸二氢钾, 无水 HPLC级 |
100 g |
|
50133 |
磷酸 HPLC级 |
50 mL |
|
通用色谱产品 |
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|
52401B |
瓶架/蓝色 |
50 孔 |
|
|
瓶架/白色 |
50孔 |
|
5323 |
样品瓶（棕色/螺纹） |
2 mL, 100/pk |
|
5325 |
样品瓶盖/含垫（已经组装） |
100/pk |
|
H80465 |
HPLC 进样针 |
25 μL |
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