2022-02-16
国家卫生健康委员会、国家市场监管总局发布关于《食品安全国家标准 预包装食品中致病菌限量》(GB 29921-2021)等17项食品安全国家标准和1项修改单的公告。其中GB 5009.265-2021《食品安全国家标准 食品中多环芳烃的测定》代替GB 5009.265-2016《食品安全国家标准 食品中多环芳烃的测定》,于2022年03月07日实施。
GB 5009.265-2021与GB 5009.265-2016相比,主要变化如下:
——将原第二法气相色谱-质谱法修订为第一法,修改了测定项目、样品前处理、气相色谱质谱条件、计算方法等;
——将原第一法高效液相色谱法修订为第二法,修改了序号,简化了原理,统一了试样制备。
多环芳烃化合物(PAHs)是一类由2个或2个以上苯环稠合而成的有毒化合物,种类繁多,具有较强致癌作用。食品在高温烘烤熏制,粮谷、植物油和奶粉原料在生产过程中工艺、技术设备及运输过程中受环境污染等原因,都会导致最终含有一定量的多环芳烃,经食用后对人体造成极大危害。
《GB 5009.265-2021 食品安全国家标准 食品中多环芳烃的测定》于2022年3月7日实施,迪马科技参考标准第一法,建立了食品中16种多环芳烃的检测,采用ProElut DVB小柱净化,DM-PAH多环芳烃分析专用毛细柱分离检测,定量限与标准方法一致,回收率结果良好。
本方案具有提取方法简单、回收率高、净化效果优异、方法稳定性好等优点;适用于各省市出入境、质检、疾控、食品药品检验所、第三方检测机构、食品检测机构、大型食品生产商、高校和科研院所等参考。
1、适用范围
本方案适用于大米粉、猪肉、植物油和婴幼儿配方奶粉中苯并[c]芴、苯并[a]蒽、环戊并[c,d]芘、䓛、5-甲基䓛、苯并[b]荧蒽、苯并[k]荧蒽、苯并[j]荧蒽、苯并[a]芘、茚并[1,2,3-c,d]芘、二苯并[a,h]蒽、苯并[g,h,i]苝、二苯并[a,l]芘、二苯并[a,e]芘、二苯并[a,i]芘、二苯并[a,h]芘的检测。
定量限:大米粉、猪肉为1.0 μg/kg;植物油为2.0 μg/kg;婴幼儿配方奶粉为0.5 μg/kg。
2、标准品配制
(1). 多环芳烃标准储备液10 μg/mL(溶剂:环己烷):Cat# 47801。
(2). 多环芳烃标准中间液2.5 μg/mL:吸取多环芳烃标准储备液10 μg/mL 2.5 mL于10 mL容量瓶中,用正己烷定容至刻度,混匀。
(3). 多环芳烃标准中间液1.0 μg/mL:吸取多环芳烃标准储备液10 μg/mL 1.0 mL于10 mL容量瓶中,用正己烷定容至刻度,混匀。
(4). 多环芳烃标准中间液500 ng/mL:吸取多环芳烃标准储备液10 μg/mL 0.5 mL于10 mL容量瓶中,用正己烷定容至刻度,混匀。
(5). 多环芳烃标准中间液200 ng/mL:吸取多环芳烃标准储备液10 μg/mL 0.2 mL于10 mL容量瓶中,用正己烷定容至刻度,混匀。
(6). 多环芳烃标准中间液100 ng/mL:吸取多环芳烃标准储备液10 μg/mL 0.1 mL于10 mL容量瓶中,用正己烷定容至刻度,混匀。
(7). 多环芳烃内标储备液100 μg/mL(溶剂:环己烷):Cat# 47802(D12-苯并[a]蒽、D12-䓛、D12-苯并[b]荧蒽、D12-苯并[a]芘、D12-茚并[1,2,3-c,d]芘、D14-二苯并[a,h]蒽、D12-苯并[g,h,i]苝)
(8). 多环芳烃内标中间液200 ng/mL:吸取多环芳烃内标储备液100 μg/mL 0.02 mL于10 mL容量瓶中,用正己烷定容至刻度,混匀。
3、提取
3.1 大米粉
称取5 g样品于50 mL离心管中,加入100 μL多环芳烃内标中间液200 ng/mL,振荡混合后静置30 min,加入5 g无水硫酸钠、20 mL乙酸乙酯-正己烷(1:1),涡旋提取1 min,超声振荡提取15 min,6000 rpm离心2 min,收集全部上清液至15 mL预称重的离心管中,45 ℃水浴下氮气吹干溶剂得提取物,称重,计算提取物质量,提取物待皂化。
若提取物质量大于1 g,则称出1 g提取物,置于另一15 mL具塞离心管中待皂化。
3.2 猪肉
称取5 g样品于50 mL离心管中,加入100 μL多环芳烃内标中间液200 ng/mL,振荡混合后静置30 min,加入20 g无水硫酸钠,用金属角匙搅拌分散,加入20 mL乙酸乙酯-正己烷(1:1),涡旋提取1 min,超声振荡提取15 min,6000 rpm离心2 min,收集全部上清液至15 mL预称重的离心管中,45 ℃水浴下氮气吹干溶剂得提取物,称重,计算提取物质量,提取物待皂化。
若提取物质量大于1 g,则称出1 g提取物,置于另一15 mL具塞离心管中待皂化。
3.3 植物油
称取1 g样品于15 mL离心管中,加入100 μL多环芳烃内标中间液200 ng/mL,待皂化。
3.4 婴幼儿配方奶粉
称取2 g样品于50 mL离心管中,加入100 μL多环芳烃内标中间液200 ng/mL,加10 mL水,涡旋溶解,加2 mL氨水充分混匀,在65 ℃水浴中放置10 min,取出冷却至室温。加入10 mL无水乙醇,缓慢混匀,加入8 mL无水乙醚,涡旋振荡5 min,再加入8 mL石油醚(沸程为30 ℃~60 ℃),涡旋振荡5 min,10000 rpm离心5 min,收集全部上清液至15 mL预称重的离心管中,45 ℃水浴下氮气吹干溶剂得提取物,称重,计算提取物质量,提取物待皂化。
4、皂化
4.1 提取物质量小于或等于0.2 g(大米粉、奶粉),加5 mL 0.3 mol/L氢氧化钾乙醇溶液,涡旋混匀,室温放置 5 min,加4 mL水、5 mL正己烷,涡旋提取2 min,6000 rpm离心2 min,上层正己烷提取液待净化。
4.2 提取物质量在0.2 g~1.0 g之间(猪肉),加入5 mL 1.5 mol/L氢氧化钾乙醇溶液,加盖涡旋混匀,放置70 ℃水浴中进行皂化3 min。皂化完成取出用自来水冷却至室温,加4 mL水、5 mL正己烷,涡旋提取2 min,6000 rpm离心2min,上层正己烷提取液待净化。
4.3 植物油试样中加入5 mL 1.5 mol/L氢氧化钾乙醇溶液,加盖涡旋混匀,放置70 ℃水浴中进行皂化3 min。皂化完成取出用自来水冷却至室温,加4 mL水、5 mL正己烷,涡旋提取2 min,6000 rpm离心2min,上层正己烷提取液待净化。
注:苯并[c]芴对碱不稳定,测定苯并[c]芴时,皂化时间视油脂质量而定,以1 g提取物皂化3 min按比例折算
5、净化——ProElut DVB 300 mg/6 mL (Cat.#: 65952)
(1)活化: |
依次用3 mL二氯甲烷、3 mL正己烷活化; |
(2)上样: |
加入待净化液,弃去流出液;控制流速1 mL/min; |
(3)淋洗: |
用5 mL正己烷淋洗,弃去流出液,控制流速1 mL/min; |
(4)洗脱: |
加入5 mL二氯甲烷-乙酸乙酯(1:1),接收全部流出液,控制流速1 mL/min; |
(5)重新溶解: |
将流出液在40 ℃水浴下氮气吹干,冷却,加0.1 mL正己烷涡旋溶解残留物,并转移至锥底进样瓶中,供GC-MS测定。 |
6、分析条件
色谱柱:DM-PAH,30 m x 0.25 mm x 0.25 μm (Cat.# 8862)
进样口温度:320 ℃
升温程序:初始温度80 ℃,保持0.5 min,以15 ℃/min升温至220 ℃,再以4 ℃/min升温至330 ℃,保持15 min。
载气:氦气
恒流模式,2.0 mL/min
进样方式:不分流进样
进样量:1.0 μL
离子源温度:230 ℃
接口温度:280 ℃
溶剂延迟:12 min
电子轰击电离源(EI):选择离子监测模式(SIM),分组监测见表1
表1 选择离子监测组表
通道 |
起始时间(min) |
结束时间(min) |
选择离子(m/z) |
1 |
15.00 |
16.00 |
213,215,216 |
2 |
18.50 |
20.00 |
224,226,227,228,229 |
3 |
21.00 |
22.50 |
239,241,242 |
4 |
24.00 |
27.50 |
250,252,253 |
5 |
31.00 |
34.00 |
274,276,277,278,279 |
6 |
37.00 |
42.00 |
300,302,303 |
表2 多环芳烃及相应内标GC-MS测定参考保留时间和监测离子
序号 |
名称 |
保留时间 min |
定量 离子 |
定性 离子 |
定量内标 |
内标保留时间 min |
内标 定量离子 |
内标 定性离子 |
1 |
苯并[c]芴 |
15.34 |
216 |
213、215 |
D12-苯并[a]蒽 |
18.83 |
240 |
236 |
2 |
苯并[a]蒽 |
18.95 |
228 |
226、229 |
||||
3 |
环戊并[c,d]芘 |
19.26 |
226 |
224、227 |
D12-䓛 |
19.19 |
240 |
236 |
4 |
䓛 |
19.33 |
228 |
226、229 |
||||
5 |
5-甲基䓛 |
21.41 |
242 |
239、241 |
||||
6 |
苯并[b]荧蒽 |
24.43 |
252 |
250、253 |
D12-苯并[b]荧蒽 |
24.29 |
264 |
260 |
7 |
苯并[k]荧蒽 |
24.55 |
252 |
250、253 |
||||
8 |
苯并[j]荧蒽 |
24.68 |
252 |
250、253 |
||||
9 |
苯并[a]芘 |
26.45 |
252 |
250、253 |
D12-苯并[a]芘 |
26.32 |
264 |
260 |
10 |
茚并[1,2,3-c,d]芘 |
31.60 |
276 |
274、277 |
D12-茚并[1,2,3-c,d]芘 |
31.47 |
288 |
284 |
11 |
二苯并[a,h]蒽 |
31.63 |
278 |
276、279 |
D14-二苯并[a,h]蒽 |
31.56 |
292 |
288 |
12 |
苯并[g,h,i]苝 |
33.06 |
276 |
274、277 |
D12-苯并[g,h,i]苝 |
32.92 |
288 |
284 |
13 |
二苯并[a,l]芘 |
37.67 |
302 |
300、303 |
||||
14 |
二苯并[a,e]芘 |
39.18 |
302 |
300、303 |
||||
15 |
二苯并[a,i]芘 |
40.07 |
302 |
300、303 |
||||
16 |
二苯并[a,h]芘 |
40.56 |
302 |
300、303 |
7、添加回收结果
目标化合物 |
回收率(%)内标法计算 |
|||||||
大米粉 |
猪肉 |
植物油 |
婴幼儿配方奶粉 |
|||||
添加水平 1.0 μg/kg |
添加水平 5.0 μg/kg |
添加水平 1.0 μg/kg |
添加水平 5.0 μg/kg |
添加水平 2.0 μg/kg |
添加水平 10 μg/kg |
添加水平 0.5 μg/kg |
添加水平 2.5 μg/kg |
|
多环芳烃 中间液 500 ng/mL 加10 μL |
多环芳烃 中间液 2.5 μg/mL 加10 μL |
多环芳烃 中间液 500 ng/mL 加10 μL |
多环芳烃 中间液 2.5 μg/mL 加10 μL |
多环芳烃 中间液 200 ng/mL 加10 μL |
多环芳烃 中间液 1.0 μg/mL 加10 μL |
多环芳烃 中间液 100 ng/mL 加10 μL |
多环芳烃 中间液 500 ng/mL 加10 μL |
|
苯并[c]芴 |
69.71 |
74.94 |
81.78 |
85.26 |
77.15 |
80.53 |
98.88 |
90.10 |
苯并[a]蒽 |
111.69 |
106.45 |
101.45 |
101.15 |
101.80 |
112.57 |
97.70 |
106.05 |
环戊并[c,d]芘 |
112.79 |
107.31 |
115.95 |
112.34 |
117.30 |
97.81 |
110.40 |
121.16 |
䓛 |
134.65 |
109.76 |
116.22 |
120.35 |
146.61 |
126.83 |
119.63 |
109.45 |
5-甲基䓛 |
109.12 |
105.30 |
105.18 |
121.20 |
101.18 |
104.99 |
92.58 |
106.32 |
苯并[b]荧蒽 |
104.76 |
110.61 |
108.26 |
105.74 |
103.44 |
116.52 |
108.48 |
108.62 |
苯并[k]荧蒽 |
121.50 |
116.73 |
108.14 |
111.91 |
100.58 |
103.40 |
107.80 |
94.64 |
苯并[j]荧蒽 |
110.71 |
108.75 |
98.18 |
103.85 |
113.42 |
108.75 |
112.94 |
91.88 |
苯并[a]芘 |
106.80 |
100.13 |
108.81 |
105.33 |
104.71 |
112.75 |
98.88 |
108.00 |
茚并[1,2,3-c,d]芘 |
107.42 |
105.11 |
104.50 |
108.20 |
129.60 |
112.40 |
101.76 |
99.68 |
二苯并[a,h]蒽 |
110.92 |
95.91 |
97.21 |
107.18 |
97.38 |
108.50 |
101.12 |
103.52 |
苯并[g,h,i]苝 |
113.50 |
105.44 |
101.65 |
104.43 |
117.50 |
109.74 |
111.00 |
104.19 |
二苯并[a,l]芘 |
123.56 |
137.39 |
136.03 |
144.43 |
136.41 |
108.28 |
145.66 |
106.08 |
二苯并[a,e]芘 |
149.04 |
134.34 |
138.36 |
139.95 |
135.33 |
108.65 |
136.24 |
117.37 |
二苯并[a,i]芘 |
139.46 |
130.71 |
137.22 |
139.33 |
116.60 |
121.51 |
139.50 |
125.02 |
二苯并[a,h]芘 |
122.64 |
130.32 |
130.41 |
136.52 |
114.71 |
107.37 |
136.42 |
135.66 |
16种多环芳烃标准溶液(100 ng/mL)TIC图(内标法)
DM-PAH多环芳烃分析专用柱,分离二苯并[a,l]芘、二苯并[a,e]芘、二苯并[a,i]芘、二苯并[a,h]芘的XIC(m/z 302)图
国标方法中推荐的DB-EUPAH,分离二苯并[a,l]芘、二苯并[a,e]芘、二苯并[a,i]芘、二苯并[a,h]芘的XIC(m/z 302)图
8、讨论
多环芳烃分析专用柱:DM-PAH, 30 m x 0.25 mm x 0.25 μm (Cat.# 8862),对16种PAHs表现出良好的惰性和选择性。DM-PAH多环芳烃分析专用柱应用于16种多环芳烃化合物的分离效果、峰形以及柱效上稍优于国标方法中推荐的DB-EUPAH毛细管柱(柱长20 m,内径0.18 mm,膜厚0.14 μm)。尤其以最后四个物质更为明显。
相关产品信息
产品描述 |
规格 |
货号 |
标准品 |
||
16种多环芳烃混标 (GB 5009.265-2021 第一法) |
10 μg/mL溶于环己烷,1 mL/安瓿 |
47801 |
7种多环芳烃内标混标 (GB 5009.265-2021 第一法) |
100 μg/mL溶于环己烷,1 mL/安瓿 |
47802 |
16种多环芳烃混标 (GB 5009.265-2021 第二法) |
200 μg/mL溶于乙腈,1 mL/安瓿 |
46960 |
样品前处理 |
||
无水硫酸钠 (第一法) |
ProElut Na2SO4 500 g |
65584 |
固相萃取小柱(聚苯乙烯-二乙烯苯聚合物)或等效净化柱: 6 mL, 300 mg (第一法) |
ProElut DVB 300 mg/6 mL 30/pk |
65952 |
N-丙基乙二胺(PSA): 粒径40 μm (第二法) |
ProElut PSA 10 g |
63281 |
封尾C18固相萃取填料: 粒径40 μm ~ 63 μm (第二法) |
ProElut C18 10 g |
63181 |
弗罗里硅土固相萃取柱: 500 mg, 3 mL (第二法) |
ProElut Florisil 500 mg / 3 mL 50/pk |
65004 |
12管防交叉污染真空SPE萃取装置 |
12位 |
244358 |
考克 (控制流量) |
15/pk |
4806 |
真空/正压两用泵, 无油 |
1/pk |
99011 |
抽滤瓶套装 (包括硅橡胶管2米, 2 L抽滤瓶及橡胶塞) |
1/pk |
99013 |
色谱分析 |
||
DB-EUPAH 毛细管柱 20 m x 0.18 mm x 0.14 μm (第一法) |
DM-PAH 30 m x 0.25 mm x 0.25 μm |
8862 |
高纯试剂 |
||
乙酸乙酯 HPLC级 |
4 L |
50104 |
二氯甲烷 HPLC级 |
4 L |
50117 |
无水乙醇 HPLC级 |
4 L |
50108 |
环己烷 HPLC级 |
4 L |
50103 |
正己烷 HPLC级 |
4 L |
50115 |
异辛烷 HPLC级 |
4 L |
50109 |
乙腈 HPLC级 |
4 L |
50101 |
通用消耗品 |
||
有机相型微孔滤膜: 0.22 μm |
FitMax PTFE 13 mm 0.22 μm 100/pk |
30043 |
瓶架/白色 |
50 孔 |
52401A |
瓶架/蓝色 |
50 孔 |
52401B |
样品瓶 (棕色/螺纹) |
2 mL, 100/pk |
1034 |
样品瓶盖/含垫 (已经组装) |
100/pk |
1035 |
GC 进样针 |
5 μL, 尖头 |
H87900 |
HPLC 进样针 |
25 μL, 平头 |
H80645 |
红色产品货号#30043、#1034、#1035火热促销中……
16种多环芳烃混标(GB 5009.265-2021 第一法)
适用于GB 5009.265-2021 食品安全国家标准 食品中多环芳烃的测定 第一法 气相色谱-质谱法,10 μg/mL在环己烷中, 1 mL/安瓿,Cat. No.: 47801
序号 |
中文名称 |
英文名称 |
CAS |
1 |
苯并[c]芴 |
Benzo[c]fluorene |
205-12-9 |
2 |
苯并[a]蒽 |
Benz[a]anthracene |
56-55-3 |
3 |
环戊并[c,d]芘 |
Cyclopenta[c,d]pyrene |
27208-37-3 |
4 |
䓛 |
Chrysene |
218-01-9 |
5 |
5-甲基䓛 |
5-Methylchrysene |
3697-24-3 |
6 |
苯并[b]荧蒽 |
Benzo[b]fluoranthene |
205-99-2 |
7 |
苯并[k]荧蒽 |
Benzo[k]fluoranthene |
207-08-9 |
8 |
苯并[j]荧蒽 |
Benzo[j]fluoranthene |
205-82-3 |
9 |
苯并[a]芘 |
Benzo[a]pyrene |
50-32-8 |
10 |
茚并[1,2,3-c,d]芘 |
Indeno[1,2,3-c,d]pyrene |
193-39-5 |
11 |
二苯并[a,h]蒽 |
Dibenz[a,h]anthracene |
53-70-3 |
12 |
苯并[g,h,i]苝 |
Benzo[g,h,i]perylene |
191-24-2 |
13 |
二苯并[a,l]芘 |
Dibenzo[a,l]pyrene |
191-30-0 |
14 |
二苯并[a,e]芘 |
Dibenzo[a,e]pyrene |
192-65-4 |
15 |
二苯并[a,i]芘 |
Dibenzo[a,i]pyrene |
189-55-9 |
16 |
二苯并[a,h]芘 |
Dibenzo[a,h]pyrene |
189-64-0 |
7种多环芳烃内标混标(GB 5009.265-2021 第一法)
适用于GB 5009.265-2021 食品安全国家标准 食品中多环芳烃的测定 第一法 气相色谱-质谱法,100 μg/mL在环己烷中, 1 mL/安瓿,Cat. No.: 47802
序号 |
中文名称 |
英文名称 |
CAS |
1 |
D12-苯并[a]蒽 |
D12-Benz[a]anthracene |
1718-53-2 |
2 |
D12-䓛 |
D12-Chrysene |
1719-03-5 |
3 |
D12-苯并[b]荧蒽 |
D12-Benzo[b]fluoranthene |
93951-98-5 |
4 |
D12-苯并[a]芘 |
D12-Benzo[a]pyrene |
63466-71-7 |
5 |
D12-茚并[1,2,3-c,d]芘 |
D12-Indeno[1,2,3-c,d]pyrene |
203578-33-0 |
6 |
D14-二苯并[a,h]蒽 |
D14-Dibenz[a,h]anthracene |
13250-98-1 |
7 |
D12-苯并[g,h,i]苝 |
D12-Benzo[g,h,i]perylene |
93951-66-7 |
16种多环芳烃混标(GB 5009.265-2021 第二法)
适用于GB 5009. 265-2016 食品安全国家标准 食品中多环芳烃的测定 第二法 高效液相色谱法,200 μg/mL在乙腈中,1 mL/安瓿,Cat. No.: 46960
序号 |
化合物 |
英文名 |
CAS |
1 |
萘 |
Naphthalene |
91-20-3 |
2 |
苊烯 |
Acenaphthylene |
208-96-8 |
3 |
苊 |
Acenaphthene |
83-32-9 |
4 |
芴 |
Fluorene |
86-73-7 |
5 |
菲 |
Phenanthrene |
85-01-8 |
6 |
蒽 |
Anthracene |
120-12-7 |
7 |
荧蒽 |
Fluoranthene |
206-44-0 |
8 |
芘 |
Pyrene |
129-00-0 |
9 |
䓛 |
Chrysene |
218-01-9 |
10 |
苯并[a]蒽 |
Benzo [a] anthracene |
56-55-3 |
11 |
苯并[b]荧蒽 |
Benzo [b] fluoranthene |
205-99-2 |
12 |
苯并[k]荧蒽 |
Benzo [k] fluoranthene |
207-08-9 |
13 |
苯并[a]芘 |
Benzo [a] pyrene |
50-32-8 |
14 |
茚并[1,2,3,-c,d]芘 |
Indeno[1,2,3-c,d] pyrene |
193-39-5 |
15 |
二苯并[a,h]蒽 |
Dibenzo [a,h] anthracene |
53-70-3 |
16 |
苯并[g,h,i]苝 |
Benzo [g,h,i] perylene |
191-24-2 |