首页/应用数据库/ HPLC测定叶酸-青霉素G酰化酶对N-苯乙酰化阿霉素的催化活性
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方法:
HPLC
基质:
药品
应用编号:
102739
化合物:
青霉素G酰化酶, N-苯乙酰化阿霉素
色谱柱:
Diamonsil C18 5μm 250 x 4.6mm
色谱条件:
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文章出处:
中国药科大学学报 2005,36(6):535-537
关键字:
叶酸, 青霉素G酰化酶, N-苯乙酰化阿霉素, 催化活性, Diamonsil C18, 钻石一代, 高效液相色谱法, HPLC
图谱:

 

摘要:目的:利用高效液相色谱法测定叶酸-青霉素G酰化酶(PGA)对N-苯乙酰化阿霉素(DOXP)的催化活性,为叶酸导向的酶催化前体药物的肿瘤治疗(FDEPT)研究奠定理论基础。方法:色谱柱为Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-水,用85%磷酸调节pH至2.4;梯度程序:0~3 min为24%乙腈,3~15min为80%乙腈;紫外检测波长:495 nm;流速:1 mL/min。结果:DOXP和酶解产物阿霉素的tR分别为5.5 min和12.3 min,原酶PGA和叶酸-PGA偶联酶对DOXP的Km和vmax分别为15μmol/mL,0.094μmol/(min.mg)和19μmol/mL,0.086μmol/(min.mg)。结论:DOXP为PGA的较好底物,叶酸与PGA偶联对酶的催化活性的影响较小。

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